HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead(荧光冻干球)

HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead(荧光冻干球)

商品属性：

产品名称	规格	货号
HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead(荧光冻干球)	100Tx25μl	BJ-PJ6574

商品介绍：

描述：

本品为 LAMP 荧光检测专用的试剂，制品为全体系冻干微球制品，包含了 HotStart Bst4.2 DNA/RNA 聚合酶、SYBR Green 染料、Helicaser、dNTP、Mg2+、反应缓冲盐，单球扩增体系为 25 μl。

Bst4.2 具有以下性能：

（1）Bst 4.2 全系包含热启动Aptamer，该配体确保酶在<30℃时，酶活封闭效率>95%,在>60℃时 1min 内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系，并大幅降低了低温条件下的非特异扩增；

（2）反应温度提升到 70℃，大幅降低引物 Dimer 的形成，提高扩增特异性，并使得粗样品核酸释放更加充分；

（3）全系包含 Helicaser，因此，允许在不使用 F3/B3 引物的情况下进行 LAMP 扩增（easy LAMP），并允许 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。这将进一步降低非特异扩增，并使得扩增均一性大幅提升。

储存：-20℃干燥密封保存 24 个月；室温（25℃）密封保存 12 个月。避免受潮。
特殊说明：
（1） Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 扩增时的推荐反应温度为 65-70℃，最佳反应温度为 70℃。因此其可完全替代  的 Bst4.0 系列，用于标准 LAMP的扩增。
（2） 由于 Helicaser 的反应温度为 70℃，因此在进行eLAMP 扩增时，反应温度为 70℃。
（3）制品中包含高浓度的盐组分，使用时做好个人防护，防止制品与皮肤、眼、鼻、呼吸道等接触和吸入，一旦接触或吸入，请用大量的清水冲洗。
（4）防止气溶胶污染，尽可能进行分区操作。
1. 标准 LAMP 和 eLAMP 扩增的区别本试剂既可以用于标准 LAMP 扩增，也可以用于 eLAMP扩增。
1.1 10x 标准 LAMP Primer MixFIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4 μM each; F3/B3=2 μM each
1.2 10xeLAMP Primer MixFIP/BIP=8 μM each; LF/LB=4 μM each
注意：eLAMP（easy LAMP）为去除 F3/B3 引物的方法，为 Bst4.2系列专用的使用策略，对于大多数引物组，在 Helicaser 的加持下，扩增速度几乎不受影响。如引物扩增效率低，可提高 FIP/BIP 浓度到 12~16 μM。
1.3 扩增温度不同
标准 LAMP 扩增 eLAMP 扩增
65-70°C 均可 70°C 反应
2. 配制 LAMP 反应体系
HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead 1 个
10x Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到总体积 25 μl
反应体系配好后，置于 65-70°C 反应 20~30min，1min 收集一次荧光信号。读取扩增曲线进行阴性和阳性判读。