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Hotstart Taq酶
中文名称: Hotstart Taq酶
其他中文名称: Hotstart Taq DNA聚合酶
英文名称: Hotstart Taq DNA Polymerase
产品规格: BR,5u/ul,99%
包装: 500U/1KU
分子量:94kDa,单体
级别:BR
纯度:≥99%
浓度:5u/ul
Hotstart Taq酶活性定义:在74℃、30分钟内,使10nmol脱氧核糖核酸合成渗入多聚核苷酸(吸附在DE-81上)所需的酶量
酶活性分析混合物:25mM TAPS(PH9.3,25℃), 50mM KC1, 2mM MgCL2, 0.2mM各种dATP,dGTP,dTTP, 0.1mM dCTP, 0.75mM活化的鲑鱼精DNA和0.4MBq/ML(3H).-dTTP
保存缓冲液组分:20mM Tris-HCL(PH9.0), 1mM DTT, 0.1mM EDTA,100mM KC1, 0.5%(V/V) Tween 20,0.5%(v/v) Nonidet P40和50%(v/v)甘油
10×Hot start PCR Buffer:200mM Tris-HCL(PH8.3,25℃), 200mM KC1, 50mM (NH4)2SO4
抑制剂:阴离子去污剂(脱氧胆酸、肌氨酰和SDS的浓度分别高于0.06、0.02和0.01%时)
失活:酚/氯仿抽提
质量控制:相关测试表明无内切或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染
功能启动:热启动PCR
性状:液体。设计用于增强DNA扩增的特异性、敏感性和产量。使用该酶可在室温配制反应体系,使用方便。它是一种化学修饰的重组Taq DNA Polymerase,蛋白分子氨基酸残基上增加了热不稳定的封闭基团。该酶在室温下没有活性,避免形成引物二聚体和非特异性延伸,从而增加DNA扩增的特异性。95℃加热4分钟可恢复活性。活化的酶具有与Taq DNA Polymerase相同的功能:催化5——3方向合成DNA,无可检测的3——5校正外切酶活性,具有较低的5——3外切酶活性。该酶还具有脱氧核糖核酸酶转移活性,在PCR产物的3-端多加11个腺嘌呤,活化前检测不到这些活性。
Hotstart Taq酶用途:生化研究。高产量扩增复杂模板;PCR特异性高-降低错配效应和减少引物二聚体的生成;增强的PCR敏感性;使用方便,室温配制PCR反应体系;扩增产物具有3-dA突出末端;热启动PCR;高产量扩增长达3kb片段;RT-PCR;特异性扩增复杂cDNA和基因组模板;扩增低拷贝DNA模板;实时PCR;多重PCR;制备TA克隆用PCR产物
保存:-20℃,保质期1年