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T7 DNA聚合酶
中文名称: T7 DNA聚合酶
英文名称: T7 DNA Polymerase
产品规格: BR,10u/ul
包装: 300U
分子量:由2个亚基组成,804kDa多肽(T7噬菌体基因5表达产物)和12kDa硫氧还蛋白(大肠杆菌trxA基因表达产物)
级别:BR
来源:两个大肠杆菌菌株,一个菌株含有T7噬菌体克隆基因5,另一个菌株含有大肠杆菌克隆基因trxA
浓度:10u/ul
活力定义:在37°C条件下,30分钟内能使10 nmol 的脱氧核糖核苷酸掺入多聚核苷酸片段(吸附在DE-81上)所需的酶量
T7 DNA聚合酶活性分析混合物:40mM Tris-HCL(PH7.5), 1mM DTT, 10mM MgCL2, 0.1mg/ml BSA, 0.033mM各种dNTP,0.4MBq/ML(3H)-dTTP和0.5mM碱性变性的牛胸腺DNA
保存缓冲液组分:20mM 磷酸钾(PH7.4), 0.1mM EDTA, 1mM DTT和50%(v/v)甘油
10×反应缓冲液:400mM Tris-HCL(PH7.5,25℃), 100mM MgCL2, 10mM DTT
抑制剂:金属螯合剂,修饰试剂(无水醋酸和N-乙基顺丁烯二酰亚胺可使3'→5' 外切核酸酶失活,但不影响聚合酶活性
失活:75℃加热10分钟
质量控制:测试表明无内切脱氧核糖核酸酶污染
使用注意:37℃分析时需要短时间孵育
性状:悬浮液,重组酶。T7 DNA聚合酶是一种模板依赖型DNA聚合酶,催化5'→3'方向的DNA合成。该DNA聚合酶具有高持续合成能力,可持续合成长片段DNA。该酶对单链和双链DNA具有3'→5'外切核酸酶活性
T7 DNA聚合酶用途:生化研究。除去残留的基因组DNA,纯化共价闭环的DNA分子;长片段引物延伸反应;DNA 3'-末端标记;定点突变位点的链延伸反应;DNA 5'-突出点位补平;第二链cDNA合成;原位检测凋亡相关DNA片段
保存:-20°C