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逆转录酶共有的活性

不同的逆转录酶具有不同的功能活性，表现出不同的逆转录效率，如合成cDNA的长度，产量，对复杂模板的适应程度等。通常共有的活性如下：
1、RNA指导的DNA聚合酶活性：以RNA为模板，催化dNTP聚合形成DNA的过程。
2、RNaseH活性：在反应过程中切割RNA：cDNA杂合链中的RNA模板。降低此活性，可避免在合成较长cDNA之前模板RNA被降解掉。
3、DNA指导的DNA聚合酶活性：以反转录合成的第一条cDNA单链为模板，再合成第二条cDNA分子。
4、热稳定性：此性能是影响cDNA合成的重要因素。升高反转录过程中的温度，有助于高GC或复杂二级结构RNA模板的变性，实现全长cDNA的合成。
5、保真性：RNA反转录为cDNA过程中的序列精确度。由于逆转录酶不具备3’-5’外切酶活性，因此没有校正功能，所以合成的cDNA出错率较高。通常，除测序对精准度要求较高外，其他情况下，反转录中引入的错误数量可忽略不计，因为cDNA中的错误不会被放大。
6、抗抑制能力：当模板纯度较低、抑制物较多时，抗抑制能力强的逆转录酶才能正常进行cDNA的合成。
目前使用的逆转录酶大都为MMLV（来源于莫洛尼鼠白血病病毒）。未经改造的MMLV最适反应温度为37℃，有较低的RNaseH活性。