进口Elisa试剂盒样本处理的事项
进口Elisa试剂盒使用注意事项：
1、螺旋盖微量进口Elisa试剂盒装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2、O13染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3、 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4、尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5、选做，阳性对照诱导剂可以按照1:1000的比例使用。例如标记好探针的细胞共1毫升，可以加入1μl的阳性对照诱导剂刺激。通常刺激后20-30分钟内可以观察到非常显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30分钟内观察不到活性氧的升高，可以适当提高活性氧阳性对照诱导剂的浓度。如果活性氧升高得过快，可以适当降低活性氧阳性对照诱导剂的浓度。
进口Elisa试剂盒样本处理：
1．刚取得的新鲜组织样本用PBS洗净。
2．准确称取50mg组织，加入1ml匀浆缓冲液A，用玻璃匀浆器充分匀浆。
3．在1000g，4℃离心10分钟，弃沉淀，取上清。
进口Elisa试剂盒样本检测：
1．在96孔板中加入190μl匀浆上清液、10μlO13探针，用移液器吹打，使之充分混匀。
2、 选做：如有必要，可以做一个阳性对照，匀浆上清加入探针后再加入10μl阳性对照。
3．在37℃避光孵育30分钟。
4．置于荧光酶标仪中，后于激发波长为488-535nm、发射波长610nm检测荧光强度。
蛋白定量：
1．另取50μl上清匀浆液，用PBS大约稀释30倍。
2．取100μl进行蛋白定量。
