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挑选适合实验ELISA试剂盒参照要素归纳

酶联免疫吸附试验ELISA(enzyme-linked immunoadsordent assay)一种酶联免疫技术。用于检测包被于固相板孔中的待测抗原(或抗体)。即用酶标记抗体,并将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使抗原抗体反应在固相载体表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除,最后通过酶作用于底物后显色来判断结果。 目前市场上的 ELISA 试剂盒质量参差不齐,试剂盒数以千计,供应商的科研实力也相差悬殊,试剂盒的质量好坏会严重影响到检测结果的准确性。因此如何去挑选适合自己的试剂盒就显得特别重要。以下为归纳ELISA试剂盒选择需考虑的要素参考。

1、基于研究物种选择

如果样品来自经典模型,如人、小鼠和大鼠,则可以相对轻松地找到经过验证的ELISA试剂盒。但如果样品来自猴子等非经典模型,则可获得的商品ELISA试剂盒数量有限。

如果要检测这些物种的指标,最好要对待检物(如有种属差异性)进行同源性分析以及试剂盒的种属交叉反应数据进行分析。


2、基于分析目的选择

ELISA是一种可用于定性和定量分析的工具。定性ELISA为样品提供简单的阳性或阴性结果,而定量ELISA通过标准曲线反映样品中分析物的浓度。您想要量化样品中的分析物还是仅检测样品的存在与否?根据分析目的,您可以选择定性ELISA或定量ELISA。


3、基于检测样本选择

大多数商业ELISA试剂盒在血清/血浆和细胞培养上清液中得到验证。请务必详细阅读产品说明书,以确保该产品与样品兼容。此外,其他因素如溶血和样品中脂质的存在会干扰分析性能。因此,在选择ELISA试剂盒之前,请考虑这些因素。建议对样品进行预实验,以验证试剂盒是否合适且对样品是否敏感。


4、基于检测范围选择

试剂盒的检测范围就是标曲范围,特别要注意待测样本浓度是否落在标曲范围内,对于浓度很高的样本,可以先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。

在此之前,我们可以通过NCBI的文献,uniprot,pax-dab上给出的蛋白表达量参考值来比较ELISA试剂盒中给出的样本值与报道值是否一致。


5、基于样本量选择

商业化试剂盒的样品用量通常需要10μL至100μL, 如果您的样品很珍贵或较难获取,则需要认真考虑试剂盒对样品用量的要求。如果样品量少,最好选择需要较少量样品的ELISA试剂盒。


6、基于文献引用选择

产品的文献引用特别是高质量的 SCI 文章的引用是很多客户都关心的问题,这是业界对产品认可的一个非常重要指标,而且对相关用户的科研有一定的借鉴作用。


7、基于售前售后服务选择

在市场经济条件下,服务理念已逐渐被企业家所重视,企业的营销环境发生了巨大的变化,高科技的广泛应用,信息高速流动,产品硬件标准趋同。对客户所能提供的技术支持服务、问题处理的及时性、客户的满意度等也是选择产品的考虑因素。


8、基于美誉度选择

一个品牌不光要有名度,更重要的是美誉度。从同行或实验室同僚了解供应商的口碑,也通过行业调查公司以及网络,相关宣传资料等可以找到美誉度高的ELISA试剂盒供应商,在一定程度上可以反映产品的质量问题。


9、基于成本预算选择

国际的品牌一般质量可靠,文献引用多。但国际品牌由于进口和国际运输等成本较高,因此售价也较高。其实优质国产品牌也是不错的选择,因省去不少物流和报关费用,与国外进口试剂盒相比价格上有较大的优惠,而且能提供比较灵活的包装规格, 如48T小包装,非常适合中国国情。


10、基于关键技术参数选择

如需选取新的 ELISA 试剂盒,首先需要仔细评估检测性能。重要参数包括灵敏度、动态范围以及精度,这些在多数的 ELISA 试剂盒说明书中都有体现。对于典型样品类型而言,其它参数对 ELISA 性能更具预测价值。

 

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